C18色譜柱作為反相液相色譜的核心組件,其性能直接影響分離效果與實驗準確性。以下是系統性養護方案:?
一、規范操作基礎?
1. 裝卸與更換:操作需輕柔避震,接頭松緊適度防漏液或柱床空隙。頻繁切換樣品類型時,建議配置專用柱以減少交叉污染風險。?
2. 流動相管理:使用前嚴格脫氣避免氣泡損害柱效;樣品需預處理過濾去除顆粒物。更換流動相應確保溶劑互溶性,防止鹽析堵塞。?
3. 壓力與溫度控制:操作壓力應低于填裝上限,推薦控制在最高壓力一半以下;啟用柱溫計時需提前通入流動相再升溫。?
二、化學環境維護?
1. pH值控制:流動相pH嚴格控制在2~7區間,超出此范圍可能導致鍵合相的水解或硅膠基質的溶解,進而造成柱床損傷。?
2. 分析后沖洗:完成工作后持續沖洗不少于0.5小時,清除殘留雜質。若流動相含鹽需先水洗,含胺類則采用50%甲醇+0.05%磷酸混合液沖洗。?
三、保存與保護措施?
1. 保存溶劑與密封:短期閑置用甲醇沖洗30~60分鐘,兩端密封保存;長期存放可定期沖洗或兩端加裝甲醇容器補償蒸發損耗。?
2. 保護柱應用:搭配同粒度填料的保護柱,攔截雜質及不可逆吸附物質,延長分析柱壽命。?
四、污染修復與再生?
1. 常規再生:依次用甲醇、甲醇/水各60mL沖洗,最后甲醇平衡封存。嚴重污染可嘗試酸堿溶液沖洗或逆流洗滌法。?
2. 物理修復:局部污染深度較小時,挖除污染段后填充相同填料修補;柱塌陷不嚴重時可顛倒使用借助流動相沖刷恢復。?
通過遵循上述養護策略,能夠顯著延長C18色譜柱的使用壽命,保障實驗結果的準確性與可靠性。